微量元素在人体内含量虽然极微小,但具有强大的生物学作用。它们参与酶、激素维生素和核酸的代谢过程,其生理功能主要表现为协助输送宏量元素;作为酶的组成成分或激活剂;在激素和维生素中起独特作用;影响核酸代谢等。在临床医学中,通过对血液中微量元素的含量进行分析,可以判断人体的健康状况,对某些元素急性或慢性中毒进行诊断,并以此为参考制定后续的治疗方案。
电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)具有灵敏度高、检出限低、动态线性范围宽、分析效率高、可多元素同时测定、谱线简单、干扰较少等优势。特别是在临床医学无机元素分析领域,这些优势更加显著。目前国标中存在一些ICꦇP-MS测定血液中单元素的相关标准,比如《血中铅的测定-第2部分:电感耦合等离子体质谱法》(GBZ/T 316.2-2018)和《血中镉的测定-第2部分:电感耦合等离子体质谱法》(GBZ/T 317.2-2018)等。但是有关ICP-MS同时测定血液中多种元素的标准则相对较少,比如《血液中铬、镉、砷🔯、铊和铅的测定-电感耦合等离子体质谱法》(SF/Z JD0107012-2011),且该标准中规定血液样品分析前需要做消解前处理,不太适用于临床血液样品的快速分析。
鉴于临床医学中多元𒐪素同时快速测定的需求日益增长,本文以谱三重四极杆(ICP-MS/MS)为例,提供一种同时测定血液中Ca、M🐟g、As、Cu、Fe、Mn、Pb、Se、Zn共9种元素的方案,该方法无需消解,可将血液样品稀释处理后直接进样分析,快速便捷。
实验部分
仪器
表1 电感耦合等离子质谱仪
表2 电感耦合等离子质谱仪检测参数
试剂及标准品
试剂:Triton X-10🐈0、优级纯硝酸、优级纯异丙醇、超纯水(电阻率≥18.♎2 MΩžcm,25℃)
标准溶液:多元素混标溶液(1000 μg/✨mL,国家有色金属研究院)、多元素内标溶液。
样品处理
(1)配制血液样品稀释剂:0.5%硝酸+0.01%曲拉通+2%异丙醇🍬,取5 mL硝酸、0.1 mL曲拉通和20 mL异丙醇,用超纯水稀释混匀定容到1000 mL。
(2)血液样本前处理:取0.5 mL血液用稀释剂稀释至10 mL,上下摇晃均匀后涡旋10分钟,5000 r🌜/min离心10分钟,取上清液进样测试。(注意:血液取样前须尽量摇晃均匀)
结果和讨论
方法精密度
为考察分析方法的稳定性,以制备的7个实际血液样品进样✃,进行方法精密度测试,各元素精密度测试结果见表5,各元素的测定值的RSD值均优于2.51%,表明该方法精密度良好。
表5方法精密度(μg/L)
实际样品测试
部分血液样品中元素含量结果见表6。
表6 血液样品测定浓度(单位:μg/L)
结论
方法采用ICP-MS/MS电感耦合等离子质谱仪对血液样本中的9种元素进行了分析。从实验结果来看,所建立标准曲线的线性系数均大于0.999,样品平行性较好;对于各元素采取合适的加标浓度进行加标实验,加标回收率都处在88.41%~112.90%之间。上述测试结果证明,对于血液这种具有复杂基体的生物样品,在开启碰撞模式的情况下,碰撞模式能有效消除基体干扰,保持较高的灵敏度、稳定性、准确度和精密度。综上,使用ICP-MS/MS通过此方案可以快速精准地完成血液中多种元素的同时测🎃定。
附录
仪器配置及试剂相关信息
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